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几种基因工程疫苗的制备原理及使用优、缺点?

274 2024-03-10 14:35

一、几种基因工程疫苗的制备原理及使用优、缺点?

20世纪80年代DNA重组的出现,为研制新1代疫苗提供了新方法.主要有亚单位疫苗、活载体疫苗、核酸疫苗、肽疫苗等,这些统称为基因工程疫苗或重组疫苗.基因工程疫苗能够克服传统疫苗的许多缺陷,采用更加安全有效的方法,代替昂贵的传统工艺.兽用基因工程疫苗的安全问题比较容易控制和处理,因此基因工程疫苗将在兽用疫苗生产上首先得到突破.

二、基因工程制备的特点?

(1)它是利用活的细胞作为表达系统来制备产品,因此,所获得的蛋白质产品往往分子量较大,并具有复杂的分子结构。

(2)许多基因工程生物制品都是参与人体一些生理功能精密调节所必须的蛋白质,它们在极微量的情况下就可以产生显著的效应.在性质或剂量上的任何偏差,都可能贻误病情甚至造成严重的危害。

(3)宿主细胞中表达的外源基因,在转录或翻译、工艺放大等过程中都有可能发生变化。

(4)分泌量极低而生理、药理活性极高.大多数的细胞生长因子在组织中的含量比一般内分泌激素更低,但引起的生物学反应却有逐步放大的作用,故作为生物制品的使用剂量非常低。

(5)具有细胞和组织特异性.大多数细胞生长因子都有各自的特异性细胞表面受体,它们引起的反应都是通过与受体结合,以形成的受体.配体复合物而开始的,因此,生长因子只对其相应的受体细胞才有活性。

(6)要求进行理化鉴定,包括产品的特性、纯度及与天然产品的一致性,如N-端15个氨基酸序列、肽图、聚丙烯酰胺凝胶电泳与等电聚焦电泳、高效液相色谱等分析。 (7)要求进行外源核酸合抗原检测,规定每剂量DNA含量不超过100pg,细胞培养产品中小牛血清含量必须合格.成品中不应含有纯化过程中使用的试剂,包括色谱柱试剂和亲和色谱用的鼠IgG等。

(8)生物活性或效力实验结果应与天然产品进行比较。

三、基因工程疫苗是什么?

基因工程疫苗(engineering vaccine)   使用DNA重组生物技术,把天然的或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中,使之充分表达,经纯化后而制得的疫苗。应用基因工程技术能制出不含感染性物质的亚单位疫苗、稳定的减毒疫苗及能预防多种疾病的多价疫苗。如把编码乙型肝炎表面抗原的基因插入酵母菌基因组,制成DNA重组乙型肝炎疫苗;把乙肝表面抗原、流感病毒血凝素、单纯疱疹病毒基因插入牛痘苗基因组中制成的多价疫苗等。   基因工程疫苗是将病原的保护性抗原编码的基因片段克隆入表达载体,用以转染细胞或真核细胞微生物及原核细胞微生物后得到的产物.或者将病原的毒力相关基因删除掉, 使成为不带毒力相关基因的基因缺失苗

四、什么是基因工程疫苗?

基因工程疫苗(engineering vaccine)   使用DNA重组生物技术,把天然的或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中,使之充分表达,经纯化后而制得的疫苗。应用基因工程技术能制出不含感染性物质的亚单位疫苗、稳定的减毒疫苗及能预防多种疾病的多价疫苗。如把编码乙型肝炎表面抗原的基因插入酵母菌基因组,制成DNA重组乙型肝炎疫苗;把乙肝表面抗原、流感病毒血凝素、单纯疱疹病毒基因插入牛痘苗基因组中制成的多价疫苗等。   基因工程疫苗是将病原的保护性抗原编码的基因片段克隆入表达载体,用以转染细胞或真核细胞微生物及原核细胞微生物后得到的产物.或者将病原的毒力相关基因删除掉, 使成为不带毒力相关基因的基因缺失苗

五、动物基因工程疫苗有哪些?

使用DNA重组生物技术,把天然的或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中,使之充分表达,经纯化后而制得的疫苗。

应用基因工程技术能制出不含感染性物质的亚单位疫苗、稳定的减毒疫苗及能预防多种疾病的多价疫苗。

如把编码乙型肝炎表面抗原的基因插入酵母菌基因组,制成DNA重组乙型肝炎疫苗;把乙肝表面抗原、流感病毒血凝素、单纯疱疹病毒基因插入牛痘苗基因组中制成的多价疫苗等。基因工程疫苗是将病原的保护性抗原编码的基因片段克隆入表达载体,用以转染细胞或真核细胞微生物及原核细胞微生物后得到的产物.或者将病原的毒力相关基因删除掉, 使成为不带毒力相关基因的基因缺失苗。

六、基因工程干扰素的制备工艺程是什么?

已知干扰素基因则可直接化学合成法合成,也可通过PCR方法得到干扰素基因序列,在目的基因两端加上粘性末端,连接到有相同粘性末端的原核生物表达质粒载体上(载体上含抗某一抗生素的基因),将质粒转导入感受态菌株,摇菌1小时后涂平板(平板中加入该抗生素,筛选成功导入质粒的菌株),挑单克隆摇菌过夜,然后鉴定导入的质粒是否成功表达干扰素。菌种可冻存于-80度。发酵罐大量培养后,取发酵液离心收集、纯化干扰素。

七、生物工程制备疫苗有哪些?

应用常规技术生产疫苗存在着抗原来源困难、有副作用和不够安全等问题。

1979年,英国爱丁堡大学麦莱实验室首先使乙型肝炎病毒表面抗原基因在大肠杆菌中表达,但产量很低。1983年,通过国际合作终于使酵母菌生产乙型肝炎病毒表面抗原的实验研究取得成功,1986年,美国食品与药物管理局批准美国默克公司生产这种基因工程乙型肝炎疫苗。由于疫苗成分中只有乙型肝炎病毒表面抗原,副作用极小,安全性很好,被称为第二代乙型肝炎疫苗,是迄今基因工程最成功的例子之一。此外,丙型肝炎疫苗以及狂犬病、麻疹、霍乱、破伤风、百日咳、小儿麻痹症、白喉、麻风等基因工程疫苗都在研究之中。中国已于1992年将基因工程乙型肝炎疫苗确定为全国新生儿普种的疫苗产品,还组建了含接近完整的甲型肝炎病毒互补DNA的质粒。

八、酿酒酵母乙肝疫苗是如何制备的?

基因重组酵母乙肝疫苗,是利用现代基因工程技术,构建含有乙肝病毒表面抗原(HBsAg)基因的重组质粒,植入酵母,酵母在繁殖过程中产生乙肝病毒的表面抗原(HBsAg)蛋白,经破碎酵母菌体,经纯化,灭活,加氢氧化铝佐剂后制成。标注为酿酒酵母,说明的生产工艺,目前我国使用的乙肝疫苗分为:重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)、重组乙型肝炎疫苗(汉逊酵母)和重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)3种。

九、汉逊酵母乙肝疫苗是如何制备的?

你问题中两个因素不过是隶属于的关系,重组酵母是基因工程制剂乙肝疫苗的一种方式。所以 从安全有效性上说没什么区别。只是厂家的工艺提纯度可能会有些影响。但现在乙肝疫苗的生产工艺已经很成熟了,正规厂家的疫苗质量都没什么问题,当然还要在正规的接种点接种,因为疫苗的保存是有温度要求的,也就是行业说的冷链保证。

具体解释如下:

乙肝疫苗基因工程就是把含有乙肝病毒外衣壳(表面抗原)的基因的质粒(RNA),通过基因工程剪切下来,然后转运到相应的宿主(如酵母、CHO细胞),然后与宿主细胞内的基因进行重组,让重组后的酵母或CHO细胞产生乙肝病毒的外衣壳(表面抗原),然后对其进行提纯,制剂,给人体接种。转基因大豆什么的,原理相同。所以,宿主细胞如果为酵母,那么其疫苗即为重组酵母乙肝疫苗;宿主为CHO细胞,那么其疫苗即为重组CHO乙肝疫苗。

酵母一般是酵母菌,有很多种酵母菌。目前制造乙肝疫苗,有利用啤酒酵母菌、与汉逊酵母菌等,无论如何酵母属于微生物界的东西。

CHO细胞为,中国仓鼠卵巢细胞,这是动物组织细胞。

从宿主亲缘性上,肯定是CHO细胞与人体更亲近。当然我们接种的毕竟是其产生的乙肝病毒表面抗原,并经过严格工序提纯等方式后制剂的乙肝疫苗,而不是宿主,所以关系也不是太大。

在没有参与任何权威的专业文献的情况下,如果你非要计较的话,我建议选择重组CHO乙肝疫苗。

再次强调,以上是在没有参阅任何相关权威文献的情况下,以个人目前的水准做的推论。不代表实际。还请参与专业的权威文献。

十、什么是基因工程?基因工程的基本步骤是怎样的?

3.2基因工程的基本操作程序导学案.pdf